現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。下面,為您說(shuō)說(shuō)怎么選擇液相色譜固定相!
老實(shí)說(shuō),我們的很多方法開(kāi)發(fā)都是在嘗試和錯(cuò)誤中進(jìn)行,這些都是基于我們喜愛(ài)的供應(yīng)商提供的成熟的或者新興的固定相。即使是先進(jìn)的含有仔細(xì)考量的正交化及電腦優(yōu)先洗脫設(shè)計(jì)的“篩選”平臺(tái),有時(shí)也不得不采取“色譜的本能”。
反相色譜中的保留是基于被分析物、流動(dòng)相、鍵合相以及鍵合了配體的硅膠表面的活性和其可接觸性之間的平衡。 想要搞清楚影響分離效果的保留機(jī)理,就要考慮并明確化學(xué)鍵合相、活性硅膠表面的處理、硅膠表面的可接觸性等因素,這些都將影響色譜柱的原始選擇性及方法開(kāi)發(fā)的優(yōu)化。
在大多數(shù)反相分離中色散作用是起主要作用的,尤其是那些使用未改性的烷基配體(C18、C8、C4),其保留能力是與被分析物的疏水性成正比的。含有芳香基團(tuán)或不飽和基團(tuán)的固定相或被分析物進(jìn)行分析時(shí),電荷轉(zhuǎn)移(或π-π)作用是起主要作用的。偶極-氫鍵相互作用對(duì)于極性化合物的保留是很重要的,含有“氰基”的固定相會(huì)增強(qiáng)對(duì)極性化合物的保留。被分析物的電離部分與硅膠表面之間存在靜電作用力,這是由于硅膠表面有殘留的可離子化的硅醇基。